ELISA试验的样本预备

2017年05月02日 09:38:10 人气: 185 来源: 上海晶抗生物工程有限公司

ELISA试剂盒在搜集样本前都有必要有一个完好的方案，有必要明白要检查的成份是否足够安稳。对搜集后当天就进行
检查的样本，及时储存在4℃备用。关于隔天再检查的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，在-70℃冻存备用。标本应防止重复冻融。

液体类标本: 包含血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1. 血清：
室温血液自然凝结10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成，应再次离心。
2. 血浆：
应根据标本的请求挑选EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成，应再次离心。
3. 尿液：
用无菌管搜集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实施。
4. 细胞培养上清：
检查排泄性的成份时，用无菌管搜集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。
5. 培养细胞
检查细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度到达100万/ml左右。经过重复冻融或参加安排蛋白萃取试剂，以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。保留过程中如有沉积构成，应再次离心。
6. 安排标本
切割标本后，称取分量。参加一定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷冻保留备用。标本融化后仍然坚持2-8℃的温度。参加一定量的PBS（PH7.4），或安排蛋白萃取试剂, 用手艺或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清。分装后一份待检查，其他冷冻备用。

植物安排：首先要称取样本的鲜重，样本分量不能低于50mg。

1，匀浆液通常选择PBS（PH=7.2-7.4)浓度为0.01mol/L。
2，匀浆的份额为10%，即1g安排加9ml的匀浆液
3，坚持样本为鲜重。
4，样本分量不能低于50mg
5，样本溶解依照10%的份额，即1g安排加9ml的匀浆液进行溶解
6，匀浆液选择PBS

关键词： ELISA试剂盒

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