ELISA试剂盒样品的重要性

2017年05月18日 09:17:16 人气: 266 来源: 上海晶抗生物工程有限公司

ELISA即酶联免疫吸附法，是一种常用的固相酶免疫测定办法。由于ELISA办法简略，便利，活络，特异性强且不需求特别设备（只需求酶标仪就可以），所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。
可是影响ELISA测定的要素有许多，而其操作中需求有必定的技能要求，如操作办法，环境，样本等，有时常可见到一些过错成果（即假阳性或假阴性）等，样本的重要性关系到全部试验的成果，上海晶抗生物为我们解读ELISA检查的影响要素之一-样本的影响
1、ELISA试剂盒样本的保留：在冰箱中保留过久的标本，在间接法ELISA测定中会致使本底过深、会形成假阳性；为防止上述问题，在测定血清标本时新鲜收集；假如不能立即测定，依据相应的时刻保留相应的温度，5 d内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应-20℃低温冻存；如冻存后融解的标本，蛋白质有些浓缩，散布不均，应充沛混合后再测定，但混匀时应轻柔，不行强烈振荡。
2、ELISA试剂盒样本的凝结：样本凝结不全。在试验中，有的时分心急为了争取时刻快速检查，在血液还未开端凝结的时分就强行离心别离血清，致使血清中仍残留有些纤维蛋白原，在ELISA测定过程中形成肉眼可见的纤维蛋白块，易形成假阳性成果；因而血液标本收集后有必要使其充沛凝结后再别离血清。
3、样本的时刻：由于塑料试管能吸附抗原物质，所以样本长时刻放在塑料管内会使样本内抗原含量降低形成假阴性。特好的办法是运用真空*；并运用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会添加OD值，EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。
4、样本受细菌污染：因菌体中可能会富含内源性辣根过氧化物酶，因而，被细菌污染的标本同溶血标本相同，可能会发生非特异性显色而搅扰测定成果。
5、ELISA试剂盒样本溶血：溶血标本及混有红细胞的血清选用ELISA法检查易发生假阳性。可能是溶血血清中富含过氧化酶物质（红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素），在洗涤过程中通常难以*洗脱，它可使H2O2释放出原生态氧（O），然后催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质，即显蓝色，发生假阳性［2］。所以严峻溶血标本禁用。

关键词： ELISA试剂盒样品的重要性

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