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如何搜集和保留ELISA试剂盒的临床标本

2017年07月05日 10:29:48 人气: 177 来源: 上海晶抗生物工程有限公司

临床ELISA试剂盒测定现通常为选用手工操作的以微孔板条为固相的测定形式,测定操作十分简略,通常涉及到标本的搜集保留、试剂预备、加样、温育、洗板、显色、比色、成果判别和成果陈述及解说等方面,其间任一过程的不妥都会影响测定成果,且尤以加样、温育和洗板等过程为甚。现分述一下临床标本的搜集和保留。

 

用于ELISA试剂盒测定的临床标本zui为常用的是血清(浆),有时由于特定的检查意图,也用到唾液、脑脊液、尿液、大便等标本。现在临床上运用血清标本测定的标志物通常有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和医治药物等。对用于激素和医治药物测定的血清标本的搜集,要留意搜集时刻甚或体位有也许会对测定成果发生影响。如可的松在早晨4~6点之间,会有一峰值呈现:生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发性方法开释。

 

因而,在测定此类激素时,有必要在密切相连的时刻距离内采纳数份血样本,以其间间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时,血清中肾素活性将呈现显着增高。再如医治药物的检查,应根据药代动力学挑选服药后的zui适时刻抽血检查。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检查的血清标本的搜集则没有时刻和体位方面的影响,只是在处理和保留方面要思考以下几个方面:

(1)要留意防止呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有相似过氧化物的活性,因而,在以HRP为符号酶的ELISA试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很简单在温育过程中吸附于固相,从而与后边加入的HRP底物反应显色。
(2)样本的收集及血清别离中要留意尽量防止细菌污染,一则细菌的生长,其所排泄的一些酶也许会对抗原抗体等蛋白发生分解效果;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶自身会对用相应酶作符号的测定方法发生非特异性搅扰。
(3)血清标本如是以无菌操作别离,则可以在2~8℃下保留一星期,如为有菌操作,则主张冰冻保留。样本的长时刻保留,应在-70℃以下。
(4)冰冻保留的血清标本须留意防止因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏效果,从而导致假阴性成果。此外,冻融标本的混匀亦应留意,不要进行剧烈振动,重复倒置混匀即可。
(5)标本在保留中如呈现细菌污染所造成的的混浊或絮状物时,应离心沉积后取上清检查。

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